组织学绪论 |
组织学绪论
组织学(显微解剖学)
组织
由形态相似、功能相关的细胞和细胞外基质或称细胞间质组织组成
按结构分为:上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织(构成人体的基本材料→基本组织)
器官
几种组织按一定规律组合构成
每种都具有一定的形态结构,并执行特定的生理功能
系统
许多功能相关的器官共同组成
消化、泌尿、循环、呼吸、生殖、运动、神经、内分泌系统
细胞外基质
由细胞产生的非细胞物质:纤维、基质和不断流动的体液(血浆、淋巴、组织液等)
参与构成细胞生存的微环境
起支持、联系、营养和保护细胞的作用,对细胞的分化、运动、信息沟通有重要影响
显微镜分类
光学显微镜(0.2μm)
石蜡切片的制作
取材
<1.0cm³
固定
使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自融和组织腐败,尽可能保存组织的原有结构
脱水
酒精脱水后用二甲苯置换酒精
包埋
增加组织硬度
切片
5-10μm
染色
使组织、细胞不同的微细结构染成不同的颜色
封片
封固剂:隔绝氧气,避免被氧化(长期保存)
HE染色法
苏木精染液(蓝)(碱性)
使嗜碱性结构变紫蓝色
伊红(红)(酸性)
使嗜酸性结构变红
知识点
嗜碱性物质(酸)
细胞核内的染色质,细胞质内的核糖体
嗜酸性物质(碱)
细胞质内的线粒体、溶酶体、滑面内质网、肌原纤维、血红蛋白,细胞外基质中的胶原纤维
中性
组织细胞对两种染液亲和力都不强
冷冻切片
制片迅速,细胞内酶活性保存较好(常用于酶组织化学染色)
非切片法
涂片法
铺片法
磨片法
电子显微镜(0.2nm)
透射电镜(TEM)
观察和研究细胞内部的微细结构
电子易被散射或被样品吸收(穿透力低),故必须制备超薄切片(50-80nm)并进行电子染色
光源:电子束。图像:只形成明暗对比
扫描电镜(SEM)
观察细胞、组织和器官表面立体微细结构
不需要制备超薄切片,组织块直径约0.3cm
知识点
超微结构
电镜下所见的结构
荧光显微镜
观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构
相差显微镜
暗视野显微镜
共聚焦激光扫描显微镜
研究目的分类
定型结构显示
取人体或实验动物的材料,在显微镜下观察其微细结构
化学成分的定位显示
组织化学和细胞化学
通过化学或物理反应原理显示组织切片细胞内某种化学成分,进行定位、定量及其与功能相关的研究
一般组织化学和细胞化学
免疫细胞化学
原位杂交术
组织和细胞化学定量术
组织和细胞形态结构及其化学成分的定量研究技术
显微镜分光光度定量术
形态计量术
流式细胞术
研究的材料对象分类
在体材料
离体或体外材料
组织或细胞培养